我们都知道小鼠是常见的模式生物,小鼠细胞系在实验室被使用的频率仅次于人源细胞,并广泛被应用于人类疾病研究、重组蛋白工业和干细胞研究中。由于细胞是一种特殊的商品,它具有可复制性,很容易被一些商家自行复制后再出售,而这些自行传代复制的细胞成本低廉,所以容易在市场上销售传播。但是细胞传代的次数、培养的条件以及是否有交叉污染等都无法得到保障,甚至有老师买了细胞做完了大部份实验后,才发现细胞被污染了。因此近年来,权威期刊为了避免因细胞错误导致的科学数据失真问题,普遍要求作者对所使用的细胞提供来源说明和鉴定结果。细胞间用于检测原代细胞与传代细胞是否一致。人鼠细胞交叉污染检测技术,采用人鼠复合扩增体系检测人类细胞中的小鼠细胞污染,或鼠源细胞中的人类细胞污染情况。该方法能证明手上的小鼠细胞是否为单一来源,能鉴定有无发生其他细胞株或其他物种来源细胞的交叉污染。在文章发表的时候,附上这样一份鉴定报告,说明细胞培养过程中一直维持原样。
适用样本类型
小鼠细胞沉淀,小鼠细胞悬液,小鼠细胞冻存液,小鼠细胞保存卡,小鼠细胞基因组
检测位点
18-3、4-2、6-7、19-2、1-2、7-1、8-1、1-1、3-2、2-1、15-3、6-4、13-1、11-2、17-2、12-1、5-5、X-1。(18个小鼠细胞STR分型检测位点。)
TH01、D5S818。(2个人源细胞STR分型检测位点。)
检测范围
是否为小鼠细胞
是否存在人鼠交叉污染
对已公布数据的小鼠细胞进行小鼠细胞株鉴定
报告类型
中文,或中英文报告
检验方法简述
将小鼠细胞悬液或细胞沉淀用基因组提取试剂盒(艾基生物)抽提全基因组DNA,微量紫外可见分光
样本要求
1、基因组DNA: OD 260/280 在1.8~2.0之间, 浓度≥30ng/μl,体积≥20μl;
2、新鲜细胞:
(1)细胞数≥1000000
(2)贴壁细胞经胰蛋白酶消化后,使用1.5mL离心管离心收集细胞沉淀;
(3)悬浮细胞直接使用1.5mL离心管离心收集细胞沉淀;
(4)PBS清洗细胞沉淀,尽可能去除培养基与胰酶;
3、冻存细胞:细胞数≥1000000,冻存细胞从液氮罐中,37℃水浴复苏,融化后使用1.5mL离心管离心收集细胞沉淀,尽可能去除冻存液,否则会影响DNA抽提质量;