焦磷酸测序法(pyrosequencing)的原理是在单管中的每一轮测序反应中只加入一种dNTP,若该dNTP与模板配对,DNA聚合酶就可以将其掺人到引物链中并释放出等摩尔的焦磷酸基团(PPi),PPi最终被特定的酶转化为可见光信号,并由检测设备量化为一个峰值,每个峰值的高度与反应中掺入的核苷酸数目成正比(Ahmadian et a1.,2006; Ronagi,2001)。随即加入下一种dNTP,继续DNA链的合成,直到读出全链的序列。相对于传统测序技术面言.pyrosequencing是一项全新的DNA测序技术,不需要电泳,对于较短的目标片段(如100bp左右)尤其有效,甚至可以在lOmin内准确地完成其序列测定,十分快捷、准确。