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DNA鉴定—PCR-SSOP

      序列特异性寡核苷酸探针囊合醇链反应技术( PCR-sequence specific oligo-nucleotide probing.SSOP)的分析步骤是:先对SNP的多态区域进行扩增,在扩增过程中对PCR产物透进行同位素或非同位素标记,然后针对PCR扩增产物根据碱基配对原则设计系列寡苷酸探针,并将其固定在膜上,最后将PCR产物与膜上的探针杂交、放射自显影.根据信号判断结果。PCR-SSOP分型技术是目前最常用、认可度最高的DVA分型技术之- (Delahunty et aL,1996)。PCR-SSOP技术具有灵敏度高、特异性强、需样本量少的特点,用于SNP分型主要包括正裕图0P方法和反栅SSOP方法两种:前者是将PCR产物固定在膜上.用标记的探针与之透行杂交;后者是将特异性探针固定在膜上,用标记的PCR产物与之杂交,目前广泛采用的是反相SSOP方法。PCR-SSOP技术由于所用的载体大多为膜或微滴定板,对于复杂而众多的SNP等位基因来说,它不具有集成化的优点,而且洗脱条件比较繁琐,难以实现标准化和自动化。
 

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