支原体检测

（1）体外细胞培养的上清；
（2）血清；
（3）各种体液，如唾液、尿液、鼻腔分泌物等；
（4）别的液体样品。本产品仅供研究使用。

产品简介

    哺乳动物细胞的培养，支原体（Mycoplasma）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误（支原体污染对细胞的详细危害，请参考本公司的网站：www.yisemed.com）。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。

    培养法是相对可靠的支原体检测技术，但是该方法非常耗时的，需要数周，不适合作为细胞培养液中支原体污染的快速检测。此外，通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体，即猪鼻支原体（M.Hyorhinis）。这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。而猪鼻支原体约占所有支原体污染的20-50%。

    有的实验室使用荧光染色法检测支原体，但是该方法灵敏度太低，当检测成阳性时，细胞经常已经严重污染。

    本公司已经开发出了专用于体外细胞培养的《一步法恒温支原体检测试剂盒》，与PCR法支原体检测相比，其具有许多优点：耗时短、灵敏度高、操作简单、不会被细胞代谢产物抑制、结果无需电泳肉眼可直接判断等。

    尽管如此，《一步法恒温支原体检测试剂盒》可能也有个小缺点：因为《一步法恒温支原体检测试剂盒》需要至少同时使用4条引物才能完成扩增，其引物设计相对困难。虽然经我们测试，该试剂盒至少可认识其说明书中列举的13种支原体，而这13种支原体大约占污染细胞的支原体种类的99%左右。但是，不排除《一步法恒温支原体检测试剂盒》无法识别个别在体外细胞培养中出现概率极低的支原体。为此，我们特意开发了具有广谱识别能力的《PCR法支原体检测试剂盒》。

    经测试，本公司开发的《PCR法支原体检测试剂盒》至少可以识别在体外细胞培养中曾经报道出现的20种支原体，根据文献报道，这些支原体基本上占污染细胞的支原体种类的100%。具体如下：（1）M. hyorhinis、（2）M. fermentans、（3）M. arginini、（4）M. hominis、（5）M. orale、（6）M. salivarium、（7）M.pirum、（8）Acholeplasma laidlawii、（9）M. agalactiae、（10）M. bovis、(11)  M. bovoculi、（12）Acholeplasma axanthum、（13）M. buccale、 (14) M. pneumoniae、（15）M. arthritidis、（16）M. pulmonis、（17）M. gallisepticum、（18）M. gallinarum、（19）M. canis、（20）Ureaplasma urealyticum（注：M.为Mycoplasma的缩写）。
如果客户发现除上述20种支原体外，还有其他的支原体也会污染体外培养的细胞，或者客户纯粹就是想检测其他的支原体，请告诉我们支原体的名称，我们将进行序列比对，然后告诉你本试剂是否可以识别。此外，根据支原体DNA的序列，本试剂盒可以识别100多种至今已发现的支原体，具有广谱的识别能力。

 

    此外，作为支原体检测领域的共识，单独使用任何一种支原体检测方法，都无法做到100%正确，既不会漏检（假阴性），也不会多检（假阳性）。严格的支原体检测，至少需要使用两种（最好使用三种）不同原理的支原体检测方法同时进行检测，才能使检测结果接近100%正确。

 

    如果您想得到100%正确的支原体检测结果（比如，开展细胞治疗的客户，进行干细胞培养的客户，生产血清、胰酶、培养液的客户，出售各种原代培养细胞系和肿瘤细胞系的客户等），任选本公司生产的《一步法恒温支原体检测试剂盒》、《PCR法支原体检测试剂盒》和《发光法支原体检测试剂盒》中的两种进行检测，将会得到比较满意的结果，检测的正确率应该在99.9%以上。如果同时使用这三种试剂盒进行检测，检测的正确率应该在99.99%以上。