1918年，俄国十月革命期间，沙皇Nicholas二世和他的家人被剥夺政权并被处以极刑。行刑队击毙了他们后，在尸体上泼洒硫酸，以致尸体无法辨认，并把他们掩埋在一条公路下的浅坑内。他们的残骸一直去向不明，直到1991年7月，在俄国Ekaterinburg附近的一座浅墓穴内发现了9具骸骨。人们尝试采用计算机辅助颅像重合技术和齿科学分析等众多法医学检验技术，但由于面颅破坏严重，常规面部识别技术非常困难，得不到任何结论。
俄国联邦首席法医师求助于英国法庭科学服务部(FSS)对骸骨进行DNA分析以识别骸骨身份，用5个STR (vWA、TH01、F13AI、FESlFPS和ACT-BP2)遗传标记对9具骸骨进行了分析。从每具骨架中钻取大约lg骨粉提取到约50pg DNA，恰可供几个STR遗传标记的PCR扩增。STR基因型发现9具骸骨中包括Romanov家庭成员（沙皇、皇后及3个孩子）、3个佣人和家庭医生。STR等位基因分析可以建立残骸间的家庭关系，但仍然必须用Romanov家族的已知后代来证实这些残骸的确是俄国的皇室家族成员，mtDNA分析技术解决了这个问题。
从每具骨架中提取线粒体DNA迸行测序，然后对Romanov家族的母系后代的血液样本进行了测序。爱丁堡公爵，即英国女王Elizabeth的丈夫PHilip亲王，是皇后Alexandra母系直系后裔的曾外甥，因此与他的血液样本费事结果的比较可以证实孩子间的同胞关系及与皇后家族的母系关系。在这次检测的mtDNA控制区共740个碱基中，Philip亲王与假定的皇后和3个孩子的序列完全匹配，假定沙皇的mtDNA序列与沙皇Nicholas二世外祖母德国地区卡塞尔的Louise的母系直系后裔的两个亲属比较后发现，这两个亲属与假定的沙皇的mtDNA序列只有nt16169碱基不同。在这个位置，假定沙皇的样本是两个碱基的混合(T和C)，即异质性，而亲属的血液样本只有T碱基。
为了进一步核实残骸的沙皇身份，他们又挖掘了Nicholas二世兄弟Georgij Romanov公爵的骸骨，并由军方DNA鉴定实验室检验(Ivanov et a1．，1996)，结果在mtDNA序列的同一碱基位置也发现有异质性。由于在两个无关个体间发生这种异质性的机会非常少，从而证实这些骸骨确是沙皇Nicholas二世和他的家庭成员，并以与皇室家族相衬的葬礼把他们安葬在红场。尽管另一个实验室核实了多个个体间的匹配，但是随着时间的推移，有关Romanov家族的争论仍在继续。
