唾液（斑）中含有脱落的口腔上皮细胞，唾液（斑）上皮细胞DNA的提取可采用有机溶剂提取法，Chelex - 100提取法和磷酸缓冲液法，具体操作如下：
1．有机提取法：
(1)将适量标本剪碎置离心管中，加入Iml生理盐水轻轻混匀冲洗细胞，5000r/min离J心
10min，弃上清后再重复一遍。
(2)在沉淀的上皮细胞中加入400t/l TES（15mmol/L Tris - HCl pH8.0，15mmol/L EDTA pH8.0, 15mmol/L NaCl），lOOoC温浴lOmin，冷却至室温再加10% SDS, lOmg/ml PK，使其终浓度分别为1%，lOOtLg/ml，37℃消化过夜。
(3)等体积饱和酚和氯仿各抽提2次，上清用2.5倍体积冰无水乙醇沉淀，1000r/min离心lOmin，沉淀晾干，灭菌去离子水溶解备用（当样品中DNA含量很少时，如果用TE缓冲液溶解，其中的EDTA浓度过高，抑制TaqDNA聚合酶活性，所以此时建议用无菌水溶解DNA)。
2．Chelex - 100提取法：
(1)将适量斑迹剪碎，加入装有200V1 5% Chelex溶液的离心管中。
(2)特lOmg/ml蛋白酶K2阻加入管中，轻轻混匀。高速震荡溶液5～10s，一定要使沉淀悬浮起来。
(3)在56℃水浴中温浴20min，高速震荡溶液5～10s。
(4)100℃煮沸8min，高速震荡溶液5～10s。
(5)在室温下15000r/min离心2min。上清用于PCR反应。4℃保存备用或-20℃储存。
3．磷酸盐缓冲液法：
(1)将适量斑迹剪碎，置于装有Iml PBS缓冲液中，1500r/min离心5min，沉淀细胞，弃上清。
(2)用50—300µl钾缓冲液悬起细胞沉淀。55℃消化1h(裂解细胞，释放DNA)。
(3) 95℃水浴10min，灭活蛋白酶K，- 20℃保存备用。
（二）口腔拭子中DNA的提取
1．将其放入装有200til的5%c1．elex - 100的1.5ml离心管内，轻轻搅动，使细胞脱落。
2．56℃温Y15～30min，高速振荡5～10S。
3．100℃煮沸8min后立即高速振荡5～10s，15000r/min离心2min。上清即可用于进行PCR反应。
注意事项：
唾液斑检材DNA提取，检材加入量不易量化，应结合检材具体情况调整。建议如下：
1．烟蒂中能否提取出DNA与烟蒂是否沾有口腔脱藩上皮细胞有关，也与抽烟者抽烟时口含烟蒂多少的习惯有关，并不是所有烟蒂均能提取出足够量的染色体DNA用于检验，DNA的提取必需用沾有唾液或口唇上皮细胞的那部分检材。不能将整个烟蒂全部投入，否则过大的载体会影响DNA的提取。烟蒂检材一般剪取0.3～0.5cm高的烟蒂，将外层纸剪碎放入1.5ml离心管中；
2．口腔拭子是国外建立DNA数据库首选的检材，立法时它属体外标本。因此，用口腔拭子进行PCR分型很多见。取单根拭子头部的1/3～1/4装入1.5ml离心管中或用牙签刮拭口腔粘膜。
3．口香糖检材取1/2左右，用无菌剪刀尽量剪碎，放入1.5ml离心管，如含泥土等，先用无菌水洗干净。
4．咬痕唾液斑检材，纱布或棉拭子擦拭咬痕部位。用纱布提取的剪取0.1～0.2cm2，棉拭子取头部1/2外层部分。
